由于鼠抗赭曲霉毒素A單克隆抗體快速、低成本、可操作性、靈敏度和選擇性等優(yōu)點(diǎn)，免疫分析法被廣泛用于檢測(cè)食品和環(huán)境中的污染物。以大限度地提高檢測(cè)靈敏度已成為免疫測(cè)定方法的研究熱點(diǎn)。就免疫分析原理而言，提高檢測(cè)靈敏度主要有兩種方法。開(kāi)發(fā)各種抗原與抗體相互作用的信號(hào)放大系統(tǒng)是一種常見(jiàn)且有效的提高靈敏度的策略，如熒光底物信號(hào)放大和化學(xué)修飾信號(hào)放大。另一種提高抗體對(duì)抗原的親和力。傳統(tǒng)抗體通過(guò)免疫動(dòng)物產(chǎn)生的親和力提高受到免疫耐受的限制。由于其復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，這些抗體也不適合體外親和成熟。相比之下,便于基因操作的基因工程抗體非常適合高親和力的抗體在體外成熟基因工程和蛋白質(zhì)工程的進(jìn)步，如單鏈可變片段和單域抗體(sdAb)。sdAb又稱納米體(nanobody,Nb)，由于其納米尺度的大小、良好的水溶性和對(duì)惡劣環(huán)境的高耐受性，而因此具有很高的研究?jī)r(jià)值。sdAb通常來(lái)源于駱駝科的重鏈抗體和軟骨魚(yú)的免疫球蛋白新抗原受體的可變區(qū)域，分別命名為VHH和VNAR。從三種噬菌體顯示的sdAb文庫(kù)中可以篩選出特異性的sdAb，包括免疫文庫(kù)、天然文庫(kù)和半合成/合成文庫(kù)。免疫庫(kù)通常用于篩選高親和力的sdAbs，目前已有大量的sdAbs被開(kāi)發(fā)用于食品和環(huán)境檢測(cè)分析。此外，sdAbs的單區(qū)域特性有利于基因修飾，不同工程化的sdAbs包括體外抗體成熟提高親和度的sdAbs、融合酶的sdAbs、帶肽標(biāo)記的sdAbs。如體外親和成熟的sdAb,研究表明，定向修飾獲得突變體sdAbN-28-t102y，該突變體親和度比親本sdAbN-28高3.2倍，在90℃，熱處理5分鐘后性保持55%。